VITRIFICAÇÃO EM LÍQUIDO FOLICULAR DE OÓCITOS BOVINOS
Criopreservação, fluido folicular, produção in vitro
A vitrificação de oócitos de bovinos é essencial para estratégias de reprodução de animais de alto valor zooténico e com fins comerciais. Em humanos, a vitrificação de oócitos é uma técnica padronizada, porém em bovinos a vitrificação ainda necessita ser aprimorada no que diz respeito à sobrevivência e competência dos oócitos pós-aquecimento. A proposta desse estudo é o desenvolvimento de um protocolo de vitrificação de oócitos bovinos imaturos e maturados in vitro empregando Fluido Folicular Bovino (FFB) em substituição ao Soro Fetal Bovino (SFB). No experimento 1, complexos cumulus oócitos (CCOs) imaturos foram vitrificados em solução contendo SFB ou FFB 20% com crioprotetores, versus o controle a fresco, em seguida foram aquecidos, maturados in vitro e avaliados para maturação nuclear. No experimento 2, CCOs maturados in vitro foram vitrificados em solução contendo SFB ou FFB 20% com crioprotetores e controle a fresco, em seguido analisada a expressão do gene hsp70 para estresse térmico, além disso dois tempos de equilíbrio (3 e 5 minutos) foram usados. Como resultado, CCOs imaturos vitrificados com SFB ou FFB não diferiram entre si (p>0,05) somente do controle ás fresco (p<0,001) quanto a taxa de maturação em metáfase II. E quanto aos oócitos maturados in vitro a análise de expressão relativa de hsp70 não foi diferente entre os grupos e tratamentos. O protocolo de vitrificação empregados mostra ser promissor, porém ainda necessita de aperfeiçoamentos.