Polimorfirmos genéticos e perfis de expressão de genes associados à imunidade inata na conjuntiva ocular em búfalos da Região Amazônica
Bubalinocultura, melhoramento genético, citocinas inflamatórias, receptores toll-like, defensinas.
A cadeia produtiva de búfalos domésticos (Bubalus bubalis) vem apresentando um elevado desempenho nos últimos anos, especialmente na Amazônia Brasileira, embora esta apresente condições ambientais dos trópicos que favorecem o aparecimento de doenças, incluindo infecções oculares. Assim, a determinação do status imunológico a partir de avaliações de genes relacionados à imunidade inata se faz necessário em populações de búfalos que habitam áreas alagadiças. Nesse contexto, buscamos determinar os perfis de expressão de genes relacionados à imunidade inata na conjuntiva ocular de búfalos da região Amazônica e caracterizar a região promotora do gene Interleucina-6, localizar possíveis SNPs e sítios de ligação dos fatores de transcrição envolvidos na regulação da expressão gênica, associando-os com resistência ou susceptibilidade a patógenos nessas populações. Para isso, amostras de tecido conjuntival ocular e sangue foram coletadas de búfalos abatidos no Estado do Amapá. Os fragmentos teciduais foram submetidos às técnicas histológicas e classificadas em três grupos (G1, G2 e G3) de acordo com o grau quantitativo de tecido linfoide associado à conjuntiva, além da técnica de PCR em tempo real para quantificação da expressão do RNA de citocinas inflamatórias (IL-6, IL-10, TNF-α, IFN-γ), receptores toll-like 4 (TLR-4) e β-defensina-112 (βDEF-112) relativa ao gene endógeno GAPDH. O sangue foi submetido ao método de PCR convencional usando dois pares de iniciadores de uma sequência de referência depositada no GenBank 102415101. Os produtos da PCR foram purificados e serão sequenciados, editados e alinhados para a análise de possíveis polimorfismos para posteriormente, serem associados com os perfis de expressão gênica. Na conjuntiva dos animais do G1 não houve expressão gênica para a maioria dos genes estudados (IL-6, IL-10, TNF-α e βDEF-112), somente para IFN-γ e TLR-4. Enquanto o G2 houve alta expressão para os genes IL-6, IL-10, IFN-γ, TLR-4, mas não para TNF-α e βDEF-112 e todos os animais do G3 apresentaram elevada expressão para todos os genes estudados. Os genes IL-6, IL-10, IFN-γ, βDEF-112 apresentaram maior expressão no G3 quando comparados aos demais grupos. Para TNF-α e TLR-4 todos os grupos apresentaram o mesmo nível de expressão gênica. Esses resultados podem sugerir uma maior resistência da população de búfalos do G3 frente a microrganismos patogênicos e que pode haver correlação positiva entre o grau quantitativo de tecido linfoide associado à conjuntiva e a resistência dos indivíduos.