ASSOCIAÇÃO DO POLIMORFISMO g4467 G>A NA 3’ UTR DO GENE INTERFERON GAMA (IFNG) COM O PERFIL DE EXPRESSÃO GÊNICA DO IFNG E DO microRNA bta-miR-125b EM BÚFALAS COM OU SEM HEMOPARASITOSES.
Búfalas. Hemoparasitoses. IFNG. Marcador Molecular. SNP.
O objetivo do presente estudo foi associar o Polimorfismo g4467 G>A presente na região 3’ UTR do gene Interferon gama (IFNG) com o perfil de expressão gênica do gene IFNG juntamente com um miRNA, o bta-miR-125b, em Búfalas sem hemoparasitoses. Por conseguinte, foram coletadas amostras de sangue de 191 búfalas. Em seguida, foram realizados os procedimentos laboratoriais de biologia molecular. A extração de DNA de sangue total foi executada através do método fenólico, em seguida as técnicas de PCR e RT-PCR foram empregadas para o diagnóstico de hemoparasitas dentre que foram: Babesia spp. Trypanosoma spp. e Anaplasma marginale. Posteriormente, foi realizada a técnica de PCR- RFLP para genotipagem do polimorfismo (g4467 G>A) no gene IFNG nas 191 búfalas. A partir dos genótipos gerados as análises de diversidade genética como frequências alélicas, genotípicas, equilíbrio de Hardy Weinberg e coeficiente de endocruzamento foram apreciadas pelo programa GENEPOP. Os resultados das técnicas de PCRs empregadas para o diagnóstico das hemoparasitoses foram todas negativas nas 191 búfalas para os três agentes. A técnica da PCR-RFLP realizada em 63 búfalas revelou padrões de bandas diferentes para o polimorfismo estudado os quais foram os genótipos GG e AA, nas proporções 3,17% e 96,83%, respectivamente sendo o alelo A o mais frequente (0,9683) na população estudada. O polimorfismo apresentou desvio no equilíbrio de Hardy-Weinberg (EHW) (P<0,05) e deficit de heterozigotos, caracterizado pelo valor de F IS positivo (1.0161).