Banca de DEFESA: JULYNE VIVIAN GUIMARÃES DE CARVALHO

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : JULYNE VIVIAN GUIMARÃES DE CARVALHO
DATA : 18/02/2022
HORA: 09:00
LOCAL: Plataforma Digital (Google Meet)
TÍTULO:

VITRIFICAÇÃO DE BIÓPSIA TESTICULAR DE GATO DOMÉSTICO (Felis catus): APRIMORAMENTO DE TÉCNICAS DE REPRODUÇÃO ASSISTIDA PARA FELINOS SELVAGENS AMEAÇADOS DE EXTINÇÃO

PALAVRAS-CHAVES:

Vitrificação, Gato doméstico, Tecido testicular, Crioprotetores, Dispositivos para criopreservação

PÁGINAS: 30
RESUMO:

A vitrificação de fragmentos de biópsia testicular é uma técnica de reprodução assistida em potencial para preservar tecido testicular de gato doméstico, principalmente por ser uma alternativa viável para a conservação de espécies felinas selvagens ameaçadas de extinção. Devido às proximidades filogenéticas, o gato doméstico é aceito como modelo experimental para felinos silvestres. Portanto, objetivou-se testar diferentes associações de agentes crioprotetores intracelulares e extracelulares na vitrificação de tecido testicular de gatos domésticos púberes, bem como determinar a técnica de vitrificação mais viável para o tecido testicular destes animais. Para isto, o estudo foi dividido em duas etapas. Na etapa 1, foram avaliados os efeitos causados pelo uso de 40% de etilenoglicol (EG) ou a associação com dimetilsulfóxido (DMSO) (20% EG + 20% DMSO), adicionado de 0,1M ou 0,5M de sacarose ou trealose, na morfologia histológica das células germinativas, células de Sertoli, medidas dos túbulos seminíferos e avaliação por score quanto a visualização e classificação do núcleo de espermatogônias e células de Sertoli, condições do epitélio tubular e desprendimento da membrana basal após a vitrificação. A partir disso, quatro grupos experimentais foram selecionados e submetidos a avaliação de viabilidade celular por sonda de fluorescência. Na etapa 2, as técnicas de vitrificação em superfície sólida (SSV), palhetas convencionais e Ovarian Tissue Cryosystem (OTC) foram avaliadas para determinar o método mais viável quanto a preservação da integridade morfológica, viabilidade celular e índice apoptótico das células no tecido testicular de gato doméstico. Na etapa 1, as espermatogônias e células de Sertoli não apresentaram diferença com o uso dos dois açúcares nas diferentes concentrações, porém, a integridade morfológica foi mais comprometida quando o DMSO foi utilizado, além de ter influenciado negativamente no score de visualização nucleolar e condensação de núcleos. Os espermatócitos foram melhor preservados com EG e 0,1M de sacarose ou trealose, já as espermátides foram positivamente afetadas com o uso de 0,1M de trealose. O diâmetro maior e a altura do epitélio aumentaram com o uso de DMSO mais sacarose 0,1M e DMSO mais trealose 0,1M, respectivamente. O grupo EG associado a 0,1M de sacarose mostrou menor score de desprendimento de membrana basal e encolhimento celular, além de maior viabilidade quando analisado por sonda de fluorescência. Na etapa 2, o método de vitrificação OTC foi superior no score de distinção entre núcleos de espermatogônia e células de Sertoli e similar ao grupo controle em preservação da membrana basal. SSV e OTC mostraram-se igualmente eficientes na manutenção de visualização nucleolar e menor índice de células apoptóticas. SSV apresentou menor score de encolhimento celular e foi superior na manutenção da viabilidade celular após a vitrificação. Sendo assim, conclui-se que o uso de EG associado a 0,1M de sacarose no meio de vitrificação foi  mais eficiente na preservação de células do tecido testicular de gato doméstico. As técnicas de vitrificação SSV ou OTC mostraram-se igualmente eficientes na manutenção das células tubulares após a vitrificação.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 480.204.273-68 - SHEYLA FARHAYLDES SOUZA DOMINGUES - UENF
Externa à Instituição - ANDRÉIA MARIA DA SILVA - UFERSA
Externa à Instituição - DANIELLE CRISTINA CALADO DE BRITO - USP
Externa à Instituição - DANUZA LEITE LEAO - UFRA