Diagnóstico molecular da infecção por hepatovírus e orthohepdnavírus em mamíferos silvestres no estado do A e B da mastofauna do Estado do Pará, Brasil
Hepatite B, Hepadnavírus, Animais silvestres, PCR, Pará
Os hepacivírus A e B são importantes agentes virais que desencadeiam infecções hepáticas, podendo levar ao óbito em casos mais graves e sendo consideradas um problema de saúde pública mundial. A busca por novos hospedeiros naturais ou não fornece dados importantes que podem ser utilizados para a melhor compreensão da evolução e sua relação com o ser humano, distribuição geográfica, variabilidade genética, prevenção e possibilidade desses animais serem reservatório de potenciais contaminações em humanos, uma vez que a transposição de barreiras inter-espécies tem sido relatada. Objetivou diagnosticar a ocorrência de Hepacivírus A e B na mastofauna do Estado do Pará, Brasil, através de análise molecular em soro de animais silvestres de vida livre e cativos. Serão analisadas 150 amostras de soros de mamíferos silvestres cativos e de vida livre do Estado do Pará, com a extração de RNA e DNA total realizada com a utilização de kit comercial. Os ensaios de PCR serão desenvolvidos para amplificação parcial dos genes de regiões conservadas para HAV (267 pb) e HVB (300 bp). Os amplicons das amostras positivas serão purificados e sequenciados nos sentidos forward e reverse, as sequências consenso serão obtidas no software BioEdit (v7.2.6) e submetidas na plataforma BLAST. Em seguida, alinhadas com um banco de dados contendo sequências representativas para genótipos e subespécies de HAV e HBV disponíveis no banco de dados do Genbank. Para análise filogenética, empregará o método de Maximum-Likelihood e o modelo Kimura 2-parâmetros no software MEGA v7.0, para identificação taxonômica dos isolados. A distância nucleotídica e de aminoácidos será calculada utilizando o software Geneious v8.1.3.