Banca de DEFESA: LÍGIA CRISTINE GONÇALVES PONTES

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: LÍGIA CRISTINE GONÇALVES PONTES
DATA: 27/08/2018
HORA: 14:30
LOCAL: ICB-UFPA
TÍTULO:

Gene MebZIP de mandioca: caracterização da proteína deduzida e avaliação do padrão de expressão gênica em condições de luminosidade

PALAVRAS-CHAVES:

bZIP, Mandioca, Regulação transcricional, Resposta à luminosidade

PÁGINAS: 38
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Genética
SUBÁREA: Genética Vegetal
RESUMO:

As proteínas da família bZIP (de Basic Leucine Zipper Domain, bZIP domain) são proteínas reguladoras que ocorrem em eucariotos e apresentam o domínio básico de ligação ao DNA, e o domínio de dimerização contendo os resíduos de leucina conservados, conhecido como zíper de leucina. Em plantas, as bZIPs atuam na regulação transcricional de genes envolvidos em diversos processos biológicos, incluindo respostas a fatores bióticos e abióticos. Estudos prévios identificaram uma sequência parcial de cDNA codificando uma proteína bZIP, denominada MebZIP, contendo 334 resíduos de aminoácidos (aa) com expressão na raiz e folha da mandioca (Manihot esculenta Crantz). No presente trabalho, com o objetivo de complementar a identificação e caracterização da MebZIP, foram realizados experimentos de RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) visando o isolamento da extremidade 3’ da sequência desse cDNA. Análises de Bioinformática mostraram que o cDNA completo da MebZIP apresenta uma ORF (Open Reading Frame) de 1320 pb codificando uma proteína constituída por 439 aa com peso molecular e ponto isoelétrico preditos de 47 kDa e 5.85, respectivamente. Análises comparativas com sequencias do GenBank mostraram alta identidade da MebZIP com as proteínas CPRF-2 de M. esculenta (XP_021620722), CPRF-2 de Hevea brasiliensis (XP_021650934) e CPRF-2 de Petroselinum crispum (Q99090.2), incluindo a presença de domínios conservados e essenciais para a funcionalidade das bZIPs. Dados da literatura mostram que as proteínas CPRF-2 podem participar da regulação do gene da sintetase da chalcona (CHS) da via de ´síntese dos fenilpropanóides, cuja expressão sofre influência da exposição à luz. Desta forma, experimentos de RT-PCR semi-quantitativa foram realizados na avaliação da expressão dos genes MebZIP e MeCHS em folhas de mandioca submetidas a diferentes períodos de exposição a luz branca (0h, 3h, 6h, 9h, 12h e 15h). Os resultados mostraram um aumento de expressão do gene MebZIP na amostra com 6h de luminosidade, contudo não foi observada correlação com a expressão do possível gene alvo da MebZIP, o gene MeCHS, o qual se manteve constante nas condições utilizadas neste trabalho. Baseado nos resultados obtidos, pode concluir que a MebZIP identificada neste trabalho contém os domínios conservados (bZIP, D1-D4) que indicam a sua funcionalidade, enquadrando-a na família dos fatores de transcrição bZIP do tipo CPRF, com potencial função na resposta à luminosidade.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 409.858.651-72 - CLAUDIA REGINA BATISTA DE SOUZA - UFPA
Externo ao Programa - 2935820 - ALINE MEDEIROS LIMA
Externo à Instituição - ROBERTO LISBOA CUNHA - EMBRAPA
Externo à Instituição - EVONNILDO COSTA GONÇALVES - UFPA